聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳分離血清蛋白的實(shí)驗(yàn)原理

實(shí)驗(yàn)原理

聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑在加速劑過硫酸銨或核黃素的作用下聚合交聯(lián)成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠，以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳。

聚丙烯酰胺凝膠具有下列特性：

1. 在一定濃度時(shí)，凝膠透明，有彈性，機(jī)械性能好；

2. 化學(xué)性能穩(wěn)定，與被分離物不起化學(xué)反應(yīng)，在很多溶劑中不溶；

3. 對(duì)PH和溫度變化較穩(wěn)定；

4. 幾乎無吸附和電滲作用，只要Acr純度高，操作條件一致，則樣品分離重復(fù)性好；

5. 樣品不易擴(kuò)散且用量少；

6. 凝膠孔徑可調(diào)節(jié)，根據(jù)被分離物的相對(duì)分子質(zhì)量選擇合適的濃度，通過改變單體及交聯(lián)劑的濃度調(diào)節(jié)凝膠的孔徑；

7. 分辨率高。

血清蛋白在紙或醋酸纖維薄膜電泳中，只能分離出5~6條區(qū)帶，而聚丙烯酰胺電泳卻可分離出數(shù)十條區(qū)帶，因而，目前PAGE已廣泛用于科研、農(nóng)、醫(yī)及臨床診斷的分析、制備，如蛋白質(zhì)、酶、核酸、血清蛋白、脂蛋白的分離及病毒